在前几篇推文中，我们讨论了免疫检测技术的基本原理，包括抗原和抗体如何相互识别、显色反应如何发生，以及信号放大的具体机制。同时，我们回顾了传统和新兴的免疫检测技术及其各自的适用场景。本篇将深入实验室，探讨免疫检测中必不可少的关键试剂，介绍它们的功能以及如何选择合适的产品。

1. 一抗（Primary Antibodies）

简单来说，一抗就像“侦探”，专门识别并结合你想检测的目标分子（抗原）。一抗具备强大的选择性，仅针对特定的抗原发挥作用，它的主要功能是寻找并锁定目标抗原，成为整个免疫检测的核心，没有它，后面的显色等步骤就无法进行。

2. 二抗（Secondary Antibodies）

二抗常常充当一抗的“助攻”，它不直接结合抗原，而是识别一抗并附带一个“放大器”（如酶或荧光染料）。由于二抗能够同时结合多个一抗，因此在二抗上结合酶或荧光染料，可以有效增强信号并提升检测灵敏度。常见的二抗类型包括酶标二抗（如HRP、AP）、荧光标记二抗（如FITC、PE）及金标二抗等。

3. 酶（Enzymes）和底物（Substrates）

在免疫检测中，通常将酶与抗体进行偶联。抗体负责特异性结合，而酶则催化底物显色或发光，从而直观地展示实验结果，产生可检测的信号。常用的酶包括HRP（辣根过氧化物酶）和AP（碱性磷酸酶）。以HRP为例，它与TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）反应生成蓝色或黄色反应，广泛应用于ELISA和WB实验中。而HRP与DAB（3,3'-二氨基联苯胺）反应则会产生棕色沉淀，适用于免疫组化（IHC）。AP与BCIP/NBT底物反应则显蓝紫色，适合背景噪声需求较高的实验。

4. 荧光素（Fluorophores）

除了通过酶催化产生显色反应外，还可以为抗体添加荧光素，这样可以通过荧光标签在荧光显微镜中直接观察抗体与目标抗原的结合情况。常见的荧光素包括FITC（绿色荧光）、PE（橙红色荧光）和Cy5（远红外荧光）等。

5. 偶联试剂（Conjugation Reagents）

如前所述，抗体需要与酶或荧光试剂进行偶联才能把不可见的信号转化为可检测的信号。常见的偶联剂有SMCC（交联抗体与酶的“化学小帮手”）以及EDC/NHS（将抗体与小分子底物“黏”在一起）。

在免疫检测试剂中，抗体是最核心的试剂。根据不同的生产工艺，免疫检测抗体可以分为单克隆抗体、多克隆抗体和重组抗体。接下来我们将重点介绍抗体的基因重排，以帮助我们更好理解这三种抗体类型之间的差异。

1. 抗体基因的免疫重排原理

抗体的多样性是源于B细胞通过“免疫重排”过程生成不同类型的抗体。每个抗体由重链和轻链两部分组成，基因编码这些链条。为产生能识别不同抗原的抗体，B细胞的基因会通过V(D)J重排机制重新组合，从而形成完整的抗体基因。这一重排过程是随机的，使得每个B细胞产生的抗体具有独特的结合特性。

2. 免疫检测抗体的不同类型

（1）单克隆抗体（mAb）：通过对抗原免疫后，取一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，产出的抗体为单克隆抗体，具有超强特异性，适合精准检测。

（2）多克隆抗体（pAb）：在免疫反应后，从上清中获得的抗体来源于多个B细胞，能够识别同一抗原的不同表位，具有更高的灵敏度。

（3）重组抗体：利用基因工程技术合成抗体编码基因，并将其转染至抗体表达细胞生产的抗体称为重组抗体，这种抗体特异性和一致性较高，适合高端检测或药物开发。

综上所述，我们汇总了在免疫检测试剂中经常需要用到的关键试剂。由于抗体的来源多样且应用场景不同，选择合适的抗体可能耗费大量时间。下个章节将为大家介绍国内外优秀的免疫检测试剂厂家，帮助大家在需要时迅速做出选择。

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